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    Authors: Menconi V.; Gustinelli A.; Caffara M.; Francalacci C.; +1 Authors

    L’anisakiasi è una zoonosi parassitaria di origine alimentare sostenuta da larve al terzo stadio (L3) di nematodi appartenenti alla famiglia Anisakidae ed in particolare al genere Anisakis. Soprattutto in seguito alla recente emergenza di sindromi allergiche da Anisakis, l’EFSA nel 2010 ha pubblicato un parere scientifico sui rischi correlati alla presenza di parassiti zoonotici in prodotti ittici, considerando sicura la pratica d’allevamento del salmone atlantico (Salmo salar) in quanto, se allevati partendo da avannotti prodotti in sistemi chiusi e alimentati sempre con mangime inerte, questi animali presenterebbero un rischio di infestazione da larve di Anisakis trascurabile. Su questa base, il Reg. UE n. 1276/2011, che modifica l’allegato III del Reg. CE n. 853\2004, puntualizza la possibile deroga al trattamento di congelamento, obbligatorio per i prodotti della pesca destinati ad essere consumati sotto forma di preparazioni a rischio (crudi, marinati, affumicati a freddo, ecc.), per i prodotti ittici derivanti da allevamento quando vengono rispettati i criteri definiti dall’EFSA analogamente al salmone atlantico. Appare quindi d’importanza strategica fornire dati scientifici estesi ed attendibili sull’assenza di parassiti zoonotici nei prodotti della maricoltura mediterranea non solo ai fini di una loro migliore qualificazione commerciale ma anche per una più facile applicabilità di tale deroga da parte delle autorità competenti. Nell’ambito delle attività di ricerca previste dal progetto europeo H2020 ParaFishControl “Advanced Tools and Research Strategies for Parasite Control in European farmed fish”, da marzo 2016 a giugno 2017 è stato condotto un esteso monitoraggio parassitologico in spigole (Dicentrarchus labrax) ed orate (Sparus aurata) allevate in Italia. Le attività di campionamento hanno coinvolto 4 allevamenti nazionali, di cui 3 in gabbie galleggianti ed uno in vasche a terra, prelevando almeno 258 esemplari per specie/allevamento suddivisi in 4 campionamenti a cadenza stagionale per un totale di 1040 spigole e 1090 orate. La numerosità campionaria è stata calcolata in modo da ottenere almeno il 95% di probabilità di evidenziare un esemplare positivo con prevalenza >2%. Per la ricerca di larve di nematodi Anisakidae sono stati associati: esame visivo diretto e mediante transilluminatore di visceri e porzioni muscolari, metodo della UV-press dei filetti e digestione con soluzione cloro- peptica del pacchetto viscerale. Tutti gli esemplari di spigola e orata esaminati sono risultati negativi per la presenza di stadi larvali di Anisakis spp. In un unico esemplare di spigola proveniente da un allevamento in gabbia è stata evidenziata la presenza di una larva di Hysterothylacium fabri (nematode non zoonotico) incistata sulla superficie del fegato ed identificata a livello di specie mediante PCR-RFLP. Alla luce della trasmissione di questo parassita a pesci predatori per via trofica, similmente ai nematodi Anisakidae zoonotici, nel prossimo futuro verranno condotte indagini mirate ad identificare i fattori di rischio che hanno condotto all’infestazione da H. fabri in allevamento, seppur in un unico esemplare, ed individuare gli eventuali punti critici da monitorare. I risultati ottenuti da questa indagine indicano comunque come nelle spigole e nelle orate allevate in Italia il rischio d’infestazione da Anisakis sia da ritenersi trascurabile, aprendo la via ad azioni di qualificazione dei prodotti della maricoltura mediterranea.

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    Authors: A. BOERI; D. LONGO; V. GIANFRATE; B. TURILLAZZI; +2 Authors

    Cultural Heritage (CH) is the result of continuously new mutating actions: physical aspect, social value and use of places are built and modified due to the presence and role of institutions, companies, associations and citizens. Historic centres, suffering of degradations, social conflicts and poor liveability, need concurred regeneration interventions able to improve their environmental conditions as well as their accessibility: these actions have to overcome tangible and intangible barriers. The H2020 ROCK research project (Regeneration and Optimisation of Cultural heritage in creative and Knowledge cities), coordinated by the Municipality of Bologna in close collaboration with the University of Bologna, aims to demonstrate how European historical centres can become permanent laboratories for testing new models of urban regeneration. Accessibility is one of the four macro-objectives pursued by the demo activities carried out in the Bologna case study: the paper describes the methodological approach and the results obtained.

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    Authors: TEDESCO, PERLA; Galuppi R.; Ciardo M. L.; Fioravanti M. L.;

    Le infezioni sostenute da oomiceti del genere Saprolegnia rappresentano un problema economicamente rilevante nell’allevamento dei salmonidi. La scarsa efficacia delle misure profilattiche attualmente disponibili e l’assenza di trattamenti registrati per il controllo della saprolegniosi non permettono di contenere significativamente le perdite in acquacoltura, rendendo di estremo interesse le ricerche focalizzate sull’individuazione di nuovi metodi di controllo. In letteratura si ritrovano numerosi studi con proposte per l’utilizzo di prodotti alternativi al verde malachite, in passato utilizzato ampiamente in acquacoltura sia su pesci che su uova per la sua elevata attività fungicida. In questo lavoro, dopo una breve review sui metodi tradizionalmente usati per il trattamento delle infezioni da Saprolegnia spp. in acquacoltura, vengono presentati i risultati di uno screening in vitro effettuato con l’obiettivo di valutare l’attività inibente e fungicida di otto sostanze pure (acido acetico, acido benzoico, acido lattico, acido ossalico, acido tartarico, perossido di idrogeno, percarbonato di sodio) e tre prodotti commerciali (Actidrox®, Detarox AP®, Virkon®,), utilizzando il verde malachite come controllo. I prodotti sono stati testati su tre diversi ceppi di Saprolegnia: un ceppo standard (CBS 233.65) di Saprolegnia parasitica isolato in Olanda da Esox lucius, un ceppo di campo di Saprolegnia parasitica isolato in Italia da Salmo trutta fario ed uno di Saprolegnia delica isolato in Italia da Oncorhynchus mykiss. Ciascun ceppo è stato testato in triplicato. Le metodiche utilizzate si sono basate sui protocolli I e II descritti da Alderman (1982) che prevedono rispettivamente un test di screening in agar, utile a valutare la minima concentrazione inibente (MIC), ed un test per contatto di un’ora in soluzione acquosa, utile a valutare la minima concentrazione letale (MLC) dei prodotti testati. Per ciascun prodotto sono state testate le seguenti concentrazioni: 0,1; 1; 5; 10, 50; 100; 250; 500; 1000; 5000 mg o μl/L (a seconda si trattasse di prodotti liquidi o solidi). L’acido benzoico ha mostrato la più bassa MIC (100 mg/L), mentre Virkon® non ha mostrato nessun effetto alle concentrazioni saggiate. Actidrox® e Detarox® hanno mostrato un comportamento differente nei due test, presentando una MLC inferiore alla MIC. Tale comportamento è probabilmente riconducibile alla modalità di azione dei prodotti, legata alla presenza di acido peracetico e che quindi probabilmente in presenza di acqua esprime meglio la sua efficacia nei confronti di Saprolegnia. I risultati di questo screening preliminare dovranno essere approfonditi con ulteriori test in vitro sui composti più promettenti al fine di valutarne il possibile futuro utilizzo in acquacoltura.

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    Authors: Galuppi R.; Sandoval-Sierra J. V.; Cainero M.; Menconi V.; +4 Authors

    La saprolegniosi è considerata un’infezione ubiquitaria all’interno dell’ecosistema dulciacquicolo, con diffusione sia nei fiumi che negli allevamenti (Willoughby & Pickering, 1977). L’agente eziologico, Saprolegnia spp., è considerato un patogeno opportunista facoltativo e molto spesso le condizioni di allevamento possono contribuire a creare situazioni favorenti l’instaurarsi dell’infezione nella popolazione. Allo scopo di valutare il potenziale trasferimento di Saprolegnia spp. dai pesci allevati a quelli selvatici e viceversa è stata effettuata un’indagine in 2 allevamenti di trota iridea (in provincia di Vicenza e di Bolzano), in 2 allevamenti di trota fario e marmorata (in provincia di Udine e Pordenone) e nei sistemi idrici tributari ed effluenti dagli stessi allevamenti. Sono stati effettuati due campionamenti: il primo in autunno/inverno e il secondo in inverno-primavera, periodi di maggiore emergenza della saprolegniosi negli allevamenti di salmonidi. Nel corso di ciascun campionamento, da ogni allevamento sono stati prelevate 10 trote, preferibilmente con lesioni riferibili a Saprolegniosi; quando possibile altrettanti pesci, con o senza lesioni, sono stati prelevati nelle acque libere sia monte che a valle di ciascun allevamento. In ciascun sito di campionamento sono inoltre state collocate 5 trappole di rete metallica contenenti ciascuna 7 porzioni di semi di canapa precedentemente sterilizzate (Seymour, 1970; Johnson et al., 2002), che sono stati lasciate in situ per almeno 10 giorni e poi raccolte. Due frammenti di micelio, per quanto riguarda i pesci con lesioni, un pezzetto di pinna dorsale e di branchia per i pesci senza lesioni, e tutti i semi di canapa recuperati dalle trappole sono stati seminati su glucose-yeast extract agar (Min et al., 1994) addizionato di penicillina (6 mg/l) e acido ossolinico (10/mg/l) (Alderman & Polglase, 1986) (GY+P+OX). Gli isolati ottenuti sono stati inviati al CSIC-RJB, Spagna, per le analisi molecolari volte alla loro identificazione a livello di specie (Sandoval-Sierra et al., 2014). Da 81 pesci campionati negli allevamenti sono stati ottenuti 61 isolati, mentre dai 27 pesci selvatici catturati a monte e dai 45 a valle, quasi tutti senza lesioni, si sono ottenuti rispettivamente 9 e 17 isolati. La specie di oomiceti riscontrata con maggior frequenza è stata Saprolegnia parasitica (78,6%), mentre altre specie sono state trovate più raramente. Dai 463 semi di canapa messe in coltura sono stati ottenuti 415 isolati, con Saprolegnia ferax quale specie più frequente (31,3%). Sebbene la composizione delle specie riscontrata in allevamento, nelle acque a monte e a valle dello stesso e nei pesci senza lesioni, sia risultata simile, nei pesci con lesioni si è osservata una maggiore prevalenza di S. parasitica. In un allevamento della provincia di Bolzano dove la saprolegniosi non veniva ritenuta un problema sanitario, S. parasitica è stata isolata solo da un pesce selvatico senza lesioni catturato a valle dell’impianto, in una zona dove venivano introdotti salmonidi per ripopolamento. Questa pratica potrebbe quindi rappresentare un rischio per la trasmissione di Saprolegnia alle popolazioni selvatiche, come già ipotizzato in altri studi. La genotipizzazione dei ceppi isolati, ancora in corso, sarà utile a chiarire meglio la circolazione di Saprolegnia spp. negli ambienti in studio, permettendo di definire le interazioni esistenti tra popolazioni allevate e selvatiche nella trasmissione di questo oomicete. Il lavoro ha comunque evidenziato come il metodo delle trappole con semi di canapa possa essere utile nell’ambito di studi epidemiologici sulla diffusione di Saprolegnia spp., in quanto permette di evitare o limitare tecniche invasive sui pesci e superare i problemi di campionamento dei pesci selvatici.

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    Authors: Errani F.; Volpe E.; Zamparo S.; Ciulli S.;

    L’encefalo-retinopatia virale (ERV) rappresenta una delle principali malattie virali che colpiscono il settore dell’acquacoltura marina. Tra le specie ittiche più colpite vi sono il branzino europeo (Dicentrarchus labrax) e l’orata (Sparus aurata). L’agente causale di questa malattia è il virus della necrosi nervosa virale (NNV), virus a ssRNA del genere Betanodavirus, famiglia Nodaviridae. Si tratta di un virus di piccole dimensioni, con capside a simmetria icosaedrica e privo di envelope. I viriori dei betanodavirus sono molto resistenti nell’ambiente acquatico e il virus può sopravvivere per lunghi periodi in acqua di mare a bassa temperatura, anche in assenza di un ospite. Al momento non sono disponibili metodi terapeutici efficaci per limitare l'impatto dell'ERV, pertanto i metodi più utilizzati per controllarla si concentrano sulle misure profilattiche volte a prevenire l’ingresso, la diffusione e la sopravvivenza del virus all’interno dell’allevamento. In particolare, alla base delle buone pratiche igienico-sanitarie raccomandate per il controllo dell’ERV vi è l’utilizzo di prodotti disinfettanti per i quali sia stata dimostrata una comprovata efficacia verso questo virus.

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    ZENODO
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      Article . 2019
      License: CC BY
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    Authors: Tedesco P.; Fioravanti M. L.; Dieguez-Uribeondo J.; Sandoval-Sierra J. V.; +4 Authors

    Gli oomiceti del genere Saprolegnia hanno un’ampia diffusione in ambiente dulciacquicolo e causano importanti perdite economiche nell’allevamento di specie ittiche d’acqua dolce, in particolare salmonidi. Obiettivo della presente ricerca è stato quello di indagare i fattori di rischio in grado di favorire l’insorgenza della saprolegniosi in troticoltura mediante uno studio epidemiologico longitudinale. Lo studio è stato condotto in 10 troticolture (5 in Italia e 5 in Spagna); gli allevamenti sono stati selezionati sulla base della presenza documentata di fattori gestionali considerati rilevanti in riferimento alla saprolegniosi (spremitura dei riproduttori, vaccinazione, selezione, frequenti cambi di vasca, ecc.). Le specie considerate nello studio sono state la trota iridea Onchorhynchus mykiss, la trota marmorata Salmo marmoratus e la trota fario Salmo trutta. In ciascun allevamento sono state condotte da Febbraio 2017 a Gennaio 2018 visite periodiche durante le quali le vasche oggetto di studio sono state controllate periodicamente per valutare la presenza di lesioni riferibili a saprolegniosi e sono state raccolte informazioni relative a fattori gestionali di diverso tipo, presenza di infezioni concomitanti e mortalità. Durante ciascuna visita sono stati inoltre registrati i paramentri ambientali (pH, temperatura e ossigeno disciolto). Il monitoraggio in continuo della temperatura dell'acqua è stato effettuato posizionando un data logger all’interno di ciascuna vasca selezionata. Le specie di Saprolegnia circolanti sono state caratterizzate mediante identificazione molecolare dei ceppi isolati da trote campionate in ciascun allevamento nel corso della prima visita. I dati raccolti sono stati analizzati statisticamente con l’obiettivo di correlare prevalenza di saprolegniosi e mortalità a diverse pratiche gestionali e fattori ambientali. Tutti gli isolati da trote con segni clinici appartenevano alla specie Saprolegnia parasitica. I risultati delle analisi statistiche indicano che la saprolegniosi rappresenta un’importante causa di mortalità nelle troticolture italiane e spagnole oggetto di studio. Con riferimento ai parametri ambientali, è stato evidenziato un contributo importante della temperatura e del pH dell’acqua. In particolare, si è confermato come la prevalenza di Saprolegnia sia mediamente più alta durante i mesi freddi (temperatura dell’acqua inferiore a 10°C) evidenziando l’influenza positiva di valori di pH alcalini. Riguardo agli aspetti gestionali, diverse tipologie di “handling” sono risultate fattori di rischio importanti. In uno degli allevamenti monitorati, è stato rilevato un incremento dei valori di prevalenza per saprolegniosi in seguito a vaccinazione intraperitoneale anche a temperature dell’acqua relativamente elevate (14°C). Inoltre, è stato osservato come frequenti cambi di vasca siano associati a valori di prevalenza più elevati anche quando, in seguito allo spostamento, la densità all’interno delle vasche viene ridotta. L’identificazione dei fattori di rischio per saprolegniosi è uno step fondamentale per una corretta progettazione ed implementazione di misure di biosicurezza e strategie di gestione finalizzate al controllo di questa parassitosi negli allevamenti di salmonidi.

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    Authors: Orioli Valentina; Massari Martina;

    Il contributo raccoglie gli esiti del progetto europeo Horizon2020 - ROCK (Regeneration and Optimisation of Cultural heritage in creative and Knowledge cities) a Bologna, come spunto per ragionare sull’approccio di ricerca e azione, di trasformazione dello spazio in cui esso si esplicita e materializza: lo spazio pubblico del centro storico, come laboratorio di innovazione. Il progetto ROCK nella città di Bologna definisce un approccio di rigenerazione che si basa su interventi in spazi pubblici, fatti di tracce e recupero di stratificazioni di memoria, da rimettere in gioco per avviare processi di rigenerazione urbana. La contemporanea pluralizzazione dei pubblici nel centro storico di Bologna rappresenta una ulteriore occasione per pensare alla definizione di una visione di sviluppo urbano critica e condivisa in accordo con gli attori istituzionali, cognitivi, extra-istituzionali, i cittadini residenti e non residenti, gli attori che vivono nelle aree centrali di Bologna, primi tra tutti gli studenti. La sperimentazione conclusasi a Bologna permettere infine di delineare un quadro di lezioni apprese rispetto a possibili modi di operare nello spazio pubblico dei centri storici, in una fase di convivenza con la pandemia di Covid-19.

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    Authors: Casadei E.; Valli E.; Aparicio-Ruiz R.; Ortiz-Romero C.; +6 Authors
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    Authors: Palagano R.; Valli E.; Tura M.; Cevoli C.; +4 Authors

    INTRODUZIONE Come ben noto, il contenuto in etil esteri degli acidi grassi (EEAGs) è considerato un parametro diretto di qualità da applicarsi per definire l’appartenenza di oli vergini di oliva (VOOs) ad una specifica categoria (limite fissato a ≤35 mg/kg per la categoria extra vergine di oliva per la legislazione UE) ed è anche ritenuto un parametro indiretto utile per mettere in luce possibili miscele fraudolente tra un olio extra vergine di oliva ed un olio soft deodorato [1]. In questo lavoro è stato proposto un approccio analitico alternativo al metodo ufficiale con lo scopo di offrire una procedura non in linea HPLC-GC-FID migliora tiva in termini di tempo di analisi, volume di solventi e livello di complessità. Più nello specifico, è stato impiegato l’HPLC per collezionare i EEAGs dagli oli vergini di oliva (VOOs) al posto della tradizionale cromatografia liquida su colonna. Inoltre, è stato testato anche un iniettore di vaporizzazione a temperatura programmata (PTV) come possibile alternativa a quello on-column poichè il PTV è considerato più versatile consentendo il controllo programmato e l’ottimizzazione della modalità di iniezione (split/splitless). Le prestazioni del metodo alternativo sono state valutate controllando i risultati ottenuti per differenti parametri che caratterizzano il protocollo di validazione interna [2]. A tale scopo, sono state analizzate tipologie specifiche di campioni quali olio di oliva raffinato aggiunto di cinque concentrazioni diverse di standard puri degli analiti di interesse e campioni reali VOOs caratterizzati da concentrazioni diverse di EEAGs (basso, medio ed alto contenuto di EEAGs) ed applicando in parallelo i due metodi (alternativo vs ufficiale). INTRODUCTION As well known, the content in fatty acid ethyl esters (FAEEs) represents a direct quality parameter to define the quality grade of virgin olive oil (VOOs) (limit set at ≤35 mg/kg oil for extra virgin olive oil category for EU regulation), and it is also considered an indirect parameter to detect fraudulent mixtures of EVOO with lower quality oils such as soft deodorized olive oils [1]. In this work, the official method has been revised to propose an alternative off-line procedure based on HPLC-GC-FID, more suitable in terms of time of analysis, volume of solvents and level of complexity. Specifically, the analytical protocol proposed HPLC for collecting FAEEs from VOOs instead of the traditional liquid chromatography of the official method. Moreover, a programmed temperature vaporizer (PTV) injector was tested as an alternative to the on-column one because PTV is considered a more versatile option as the temperature control is time-programmed and the injection mode (split/splitless) can be optimized. The performance of the alternative method was evaluated, checking the results in terms of several parameters regarding in-house validation protocol [2]. For this control, specific kinds of samples as refined olive oil spiked with five concentrations of a pure standard of analytes of interest and real VOOs characterized by different contents of FAEEs (low, medium, high) were analyzed applying in parallel the two methods (alternative vs official) (see the Figure). RESULTS The main advantages of this revised protocol may be summarized as: i) significant reduction in time and solvents needed (reduction of more than 50% and 80% for time and solvents, respectively compared to the official procedure); ii) simplification of the separation step of FAEEs fraction avoiding the manual packing of the glass column for the liquid chromatography; iii) satisfactory performance in terms of in-house validation results: linearity showed linear response between 2.5 and 50 mg/L; percentages of standard deviation related to intra-day and inter-day precision were lower than 15%; LOD and LOQ were lower than 1 and 1.5 mg/kg, respectively; in the case of the concentration of FAEEs closer to the legal limit, the recoveries of each analyte were higher than 94%; iv) no significant differences were evidenced for analytes of interest when the alternative procedure offline HPLC-GC-FID with PTV injector was applied to actual samples with low, medium and high content of FAEEs with respect to the official method.

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    Authors: Menconi V.; Gustinelli A.; Caffara M.; Francalacci C.; +1 Authors

    L’anisakiasi è una zoonosi parassitaria di origine alimentare sostenuta da larve al terzo stadio (L3) di nematodi appartenenti alla famiglia Anisakidae ed in particolare al genere Anisakis. Soprattutto in seguito alla recente emergenza di sindromi allergiche da Anisakis, l’EFSA nel 2010 ha pubblicato un parere scientifico sui rischi correlati alla presenza di parassiti zoonotici in prodotti ittici, considerando sicura la pratica d’allevamento del salmone atlantico (Salmo salar) in quanto, se allevati partendo da avannotti prodotti in sistemi chiusi e alimentati sempre con mangime inerte, questi animali presenterebbero un rischio di infestazione da larve di Anisakis trascurabile. Su questa base, il Reg. UE n. 1276/2011, che modifica l’allegato III del Reg. CE n. 853\2004, puntualizza la possibile deroga al trattamento di congelamento, obbligatorio per i prodotti della pesca destinati ad essere consumati sotto forma di preparazioni a rischio (crudi, marinati, affumicati a freddo, ecc.), per i prodotti ittici derivanti da allevamento quando vengono rispettati i criteri definiti dall’EFSA analogamente al salmone atlantico. Appare quindi d’importanza strategica fornire dati scientifici estesi ed attendibili sull’assenza di parassiti zoonotici nei prodotti della maricoltura mediterranea non solo ai fini di una loro migliore qualificazione commerciale ma anche per una più facile applicabilità di tale deroga da parte delle autorità competenti. Nell’ambito delle attività di ricerca previste dal progetto europeo H2020 ParaFishControl “Advanced Tools and Research Strategies for Parasite Control in European farmed fish”, da marzo 2016 a giugno 2017 è stato condotto un esteso monitoraggio parassitologico in spigole (Dicentrarchus labrax) ed orate (Sparus aurata) allevate in Italia. Le attività di campionamento hanno coinvolto 4 allevamenti nazionali, di cui 3 in gabbie galleggianti ed uno in vasche a terra, prelevando almeno 258 esemplari per specie/allevamento suddivisi in 4 campionamenti a cadenza stagionale per un totale di 1040 spigole e 1090 orate. La numerosità campionaria è stata calcolata in modo da ottenere almeno il 95% di probabilità di evidenziare un esemplare positivo con prevalenza >2%. Per la ricerca di larve di nematodi Anisakidae sono stati associati: esame visivo diretto e mediante transilluminatore di visceri e porzioni muscolari, metodo della UV-press dei filetti e digestione con soluzione cloro- peptica del pacchetto viscerale. Tutti gli esemplari di spigola e orata esaminati sono risultati negativi per la presenza di stadi larvali di Anisakis spp. In un unico esemplare di spigola proveniente da un allevamento in gabbia è stata evidenziata la presenza di una larva di Hysterothylacium fabri (nematode non zoonotico) incistata sulla superficie del fegato ed identificata a livello di specie mediante PCR-RFLP. Alla luce della trasmissione di questo parassita a pesci predatori per via trofica, similmente ai nematodi Anisakidae zoonotici, nel prossimo futuro verranno condotte indagini mirate ad identificare i fattori di rischio che hanno condotto all’infestazione da H. fabri in allevamento, seppur in un unico esemplare, ed individuare gli eventuali punti critici da monitorare. I risultati ottenuti da questa indagine indicano comunque come nelle spigole e nelle orate allevate in Italia il rischio d’infestazione da Anisakis sia da ritenersi trascurabile, aprendo la via ad azioni di qualificazione dei prodotti della maricoltura mediterranea.

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    Authors: A. BOERI; D. LONGO; V. GIANFRATE; B. TURILLAZZI; +2 Authors

    Cultural Heritage (CH) is the result of continuously new mutating actions: physical aspect, social value and use of places are built and modified due to the presence and role of institutions, companies, associations and citizens. Historic centres, suffering of degradations, social conflicts and poor liveability, need concurred regeneration interventions able to improve their environmental conditions as well as their accessibility: these actions have to overcome tangible and intangible barriers. The H2020 ROCK research project (Regeneration and Optimisation of Cultural heritage in creative and Knowledge cities), coordinated by the Municipality of Bologna in close collaboration with the University of Bologna, aims to demonstrate how European historical centres can become permanent laboratories for testing new models of urban regeneration. Accessibility is one of the four macro-objectives pursued by the demo activities carried out in the Bologna case study: the paper describes the methodological approach and the results obtained.

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    Authors: TEDESCO, PERLA; Galuppi R.; Ciardo M. L.; Fioravanti M. L.;

    Le infezioni sostenute da oomiceti del genere Saprolegnia rappresentano un problema economicamente rilevante nell’allevamento dei salmonidi. La scarsa efficacia delle misure profilattiche attualmente disponibili e l’assenza di trattamenti registrati per il controllo della saprolegniosi non permettono di contenere significativamente le perdite in acquacoltura, rendendo di estremo interesse le ricerche focalizzate sull’individuazione di nuovi metodi di controllo. In letteratura si ritrovano numerosi studi con proposte per l’utilizzo di prodotti alternativi al verde malachite, in passato utilizzato ampiamente in acquacoltura sia su pesci che su uova per la sua elevata attività fungicida. In questo lavoro, dopo una breve review sui metodi tradizionalmente usati per il trattamento delle infezioni da Saprolegnia spp. in acquacoltura, vengono presentati i risultati di uno screening in vitro effettuato con l’obiettivo di valutare l’attività inibente e fungicida di otto sostanze pure (acido acetico, acido benzoico, acido lattico, acido ossalico, acido tartarico, perossido di idrogeno, percarbonato di sodio) e tre prodotti commerciali (Actidrox®, Detarox AP®, Virkon®,), utilizzando il verde malachite come controllo. I prodotti sono stati testati su tre diversi ceppi di Saprolegnia: un ceppo standard (CBS 233.65) di Saprolegnia parasitica isolato in Olanda da Esox lucius, un ceppo di campo di Saprolegnia parasitica isolato in Italia da Salmo trutta fario ed uno di Saprolegnia delica isolato in Italia da Oncorhynchus mykiss. Ciascun ceppo è stato testato in triplicato. Le metodiche utilizzate si sono basate sui protocolli I e II descritti da Alderman (1982) che prevedono rispettivamente un test di screening in agar, utile a valutare la minima concentrazione inibente (MIC), ed un test per contatto di un’ora in soluzione acquosa, utile a valutare la minima concentrazione letale (MLC) dei prodotti testati. Per ciascun prodotto sono state testate le seguenti concentrazioni: 0,1; 1; 5; 10, 50; 100; 250; 500; 1000; 5000 mg o μl/L (a seconda si trattasse di prodotti liquidi o solidi). L’acido benzoico ha mostrato la più bassa MIC (100 mg/L), mentre Virkon® non ha mostrato nessun effetto alle concentrazioni saggiate. Actidrox® e Detarox® hanno mostrato un comportamento differente nei due test, presentando una MLC inferiore alla MIC. Tale comportamento è probabilmente riconducibile alla modalità di azione dei prodotti, legata alla presenza di acido peracetico e che quindi probabilmente in presenza di acqua esprime meglio la sua efficacia nei confronti di Saprolegnia. I risultati di questo screening preliminare dovranno essere approfonditi con ulteriori test in vitro sui composti più promettenti al fine di valutarne il possibile futuro utilizzo in acquacoltura.

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    Authors: Galuppi R.; Sandoval-Sierra J. V.; Cainero M.; Menconi V.; +4 Authors

    La saprolegniosi è considerata un’infezione ubiquitaria all’interno dell’ecosistema dulciacquicolo, con diffusione sia nei fiumi che negli allevamenti (Willoughby & Pickering, 1977). L’agente eziologico, Saprolegnia spp., è considerato un patogeno opportunista facoltativo e molto spesso le condizioni di allevamento possono contribuire a creare situazioni favorenti l’instaurarsi dell’infezione nella popolazione. Allo scopo di valutare il potenziale trasferimento di Saprolegnia spp. dai pesci allevati a quelli selvatici e viceversa è stata effettuata un’indagine in 2 allevamenti di trota iridea (in provincia di Vicenza e di Bolzano), in 2 allevamenti di trota fario e marmorata (in provincia di Udine e Pordenone) e nei sistemi idrici tributari ed effluenti dagli stessi allevamenti. Sono stati effettuati due campionamenti: il primo in autunno/inverno e il secondo in inverno-primavera, periodi di maggiore emergenza della saprolegniosi negli allevamenti di salmonidi. Nel corso di ciascun campionamento, da ogni allevamento sono stati prelevate 10 trote, preferibilmente con lesioni riferibili a Saprolegniosi; quando possibile altrettanti pesci, con o senza lesioni, sono stati prelevati nelle acque libere sia monte che a valle di ciascun allevamento. In ciascun sito di campionamento sono inoltre state collocate 5 trappole di rete metallica contenenti ciascuna 7 porzioni di semi di canapa precedentemente sterilizzate (Seymour, 1970; Johnson et al., 2002), che sono stati lasciate in situ per almeno 10 giorni e poi raccolte. Due frammenti di micelio, per quanto riguarda i pesci con lesioni, un pezzetto di pinna dorsale e di branchia per i pesci senza lesioni, e tutti i semi di canapa recuperati dalle trappole sono stati seminati su glucose-yeast extract agar (Min et al., 1994) addizionato di penicillina (6 mg/l) e acido ossolinico (10/mg/l) (Alderman & Polglase, 1986) (GY+P+OX). Gli isolati ottenuti sono stati inviati al CSIC-RJB, Spagna, per le analisi molecolari volte alla loro identificazione a livello di specie (Sandoval-Sierra et al., 2014). Da 81 pesci campionati negli allevamenti sono stati ottenuti 61 isolati, mentre dai 27 pesci selvatici catturati a monte e dai 45 a valle, quasi tutti senza lesioni, si sono ottenuti rispettivamente 9 e 17 isolati. La specie di oomiceti riscontrata con maggior frequenza è stata Saprolegnia parasitica (78,6%), mentre altre specie sono state trovate più raramente. Dai 463 semi di canapa messe in coltura sono stati ottenuti 415 isolati, con Saprolegnia ferax quale specie più frequente (31,3%). Sebbene la composizione delle specie riscontrata in allevamento, nelle acque a monte e a valle dello stesso e nei pesci senza lesioni, sia risultata simile, nei pesci con lesioni si è osservata una maggiore prevalenza di S. parasitica. In un allevamento della provincia di Bolzano dove la saprolegniosi non veniva ritenuta un problema sanitario, S. parasitica è stata isolata solo da un pesce selvatico senza lesioni catturato a valle dell’impianto, in una zona dove venivano introdotti salmonidi per ripopolamento. Questa pratica potrebbe quindi rappresentare un rischio per la trasmissione di Saprolegnia alle popolazioni selvatiche, come già ipotizzato in altri studi. La genotipizzazione dei ceppi isolati, ancora in corso, sarà utile a chiarire meglio la circolazione di Saprolegnia spp. negli ambienti in studio, permettendo di definire le interazioni esistenti tra popolazioni allevate e selvatiche nella trasmissione di questo oomicete. Il lavoro ha comunque evidenziato come il metodo delle trappole con semi di canapa possa essere utile nell’ambito di studi epidemiologici sulla diffusione di Saprolegnia spp., in quanto permette di evitare o limitare tecniche invasive sui pesci e superare i problemi di campionamento dei pesci selvatici.

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    Authors: Errani F.; Volpe E.; Zamparo S.; Ciulli S.;

    L’encefalo-retinopatia virale (ERV) rappresenta una delle principali malattie virali che colpiscono il settore dell’acquacoltura marina. Tra le specie ittiche più colpite vi sono il branzino europeo (Dicentrarchus labrax) e l’orata (Sparus aurata). L’agente causale di questa malattia è il virus della necrosi nervosa virale (NNV), virus a ssRNA del genere Betanodavirus, famiglia Nodaviridae. Si tratta di un virus di piccole dimensioni, con capside a simmetria icosaedrica e privo di envelope. I viriori dei betanodavirus sono molto resistenti nell’ambiente acquatico e il virus può sopravvivere per lunghi periodi in acqua di mare a bassa temperatura, anche in assenza di un ospite. Al momento non sono disponibili metodi terapeutici efficaci per limitare l'impatto dell'ERV, pertanto i metodi più utilizzati per controllarla si concentrano sulle misure profilattiche volte a prevenire l’ingresso, la diffusione e la sopravvivenza del virus all’interno dell’allevamento. In particolare, alla base delle buone pratiche igienico-sanitarie raccomandate per il controllo dell’ERV vi è l’utilizzo di prodotti disinfettanti per i quali sia stata dimostrata una comprovata efficacia verso questo virus.

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    Authors: Tedesco P.; Fioravanti M. L.; Dieguez-Uribeondo J.; Sandoval-Sierra J. V.; +4 Authors

    Gli oomiceti del genere Saprolegnia hanno un’ampia diffusione in ambiente dulciacquicolo e causano importanti perdite economiche nell’allevamento di specie ittiche d’acqua dolce, in particolare salmonidi. Obiettivo della presente ricerca è stato quello di indagare i fattori di rischio in grado di favorire l’insorgenza della saprolegniosi in troticoltura mediante uno studio epidemiologico longitudinale. Lo studio è stato condotto in 10 troticolture (5 in Italia e 5 in Spagna); gli allevamenti sono stati selezionati sulla base della presenza documentata di fattori gestionali considerati rilevanti in riferimento alla saprolegniosi (spremitura dei riproduttori, vaccinazione, selezione, frequenti cambi di vasca, ecc.). Le specie considerate nello studio sono state la trota iridea Onchorhynchus mykiss, la trota marmorata Salmo marmoratus e la trota fario Salmo trutta. In ciascun allevamento sono state condotte da Febbraio 2017 a Gennaio 2018 visite periodiche durante le quali le vasche oggetto di studio sono state controllate periodicamente per valutare la presenza di lesioni riferibili a saprolegniosi e sono state raccolte informazioni relative a fattori gestionali di diverso tipo, presenza di infezioni concomitanti e mortalità. Durante ciascuna visita sono stati inoltre registrati i paramentri ambientali (pH, temperatura e ossigeno disciolto). Il monitoraggio in continuo della temperatura dell'acqua è stato effettuato posizionando un data logger all’interno di ciascuna vasca selezionata. Le specie di Saprolegnia circolanti sono state caratterizzate mediante identificazione molecolare dei ceppi isolati da trote campionate in ciascun allevamento nel corso della prima visita. I dati raccolti sono stati analizzati statisticamente con l’obiettivo di correlare prevalenza di saprolegniosi e mortalità a diverse pratiche gestionali e fattori ambientali. Tutti gli isolati da trote con segni clinici appartenevano alla specie Saprolegnia parasitica. I risultati delle analisi statistiche indicano che la saprolegniosi rappresenta un’importante causa di mortalità nelle troticolture italiane e spagnole oggetto di studio. Con riferimento ai parametri ambientali, è stato evidenziato un contributo importante della temperatura e del pH dell’acqua. In particolare, si è confermato come la prevalenza di Saprolegnia sia mediamente più alta durante i mesi freddi (temperatura dell’acqua inferiore a 10°C) evidenziando l’influenza positiva di valori di pH alcalini. Riguardo agli aspetti gestionali, diverse tipologie di “handling” sono risultate fattori di rischio importanti. In uno degli allevamenti monitorati, è stato rilevato un incremento dei valori di prevalenza per saprolegniosi in seguito a vaccinazione intraperitoneale anche a temperature dell’acqua relativamente elevate (14°C). Inoltre, è stato osservato come frequenti cambi di vasca siano associati a valori di prevalenza più elevati anche quando, in seguito allo spostamento, la densità all’interno delle vasche viene ridotta. L’identificazione dei fattori di rischio per saprolegniosi è uno step fondamentale per una corretta progettazione ed implementazione di misure di biosicurezza e strategie di gestione finalizzate al controllo di questa parassitosi negli allevamenti di salmonidi.

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    Authors: Orioli Valentina; Massari Martina;

    Il contributo raccoglie gli esiti del progetto europeo Horizon2020 - ROCK (Regeneration and Optimisation of Cultural heritage in creative and Knowledge cities) a Bologna, come spunto per ragionare sull’approccio di ricerca e azione, di trasformazione dello spazio in cui esso si esplicita e materializza: lo spazio pubblico del centro storico, come laboratorio di innovazione. Il progetto ROCK nella città di Bologna definisce un approccio di rigenerazione che si basa su interventi in spazi pubblici, fatti di tracce e recupero di stratificazioni di memoria, da rimettere in gioco per avviare processi di rigenerazione urbana. La contemporanea pluralizzazione dei pubblici nel centro storico di Bologna rappresenta una ulteriore occasione per pensare alla definizione di una visione di sviluppo urbano critica e condivisa in accordo con gli attori istituzionali, cognitivi, extra-istituzionali, i cittadini residenti e non residenti, gli attori che vivono nelle aree centrali di Bologna, primi tra tutti gli studenti. La sperimentazione conclusasi a Bologna permettere infine di delineare un quadro di lezioni apprese rispetto a possibili modi di operare nello spazio pubblico dei centri storici, in una fase di convivenza con la pandemia di Covid-19.

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    Authors: Casadei E.; Valli E.; Aparicio-Ruiz R.; Ortiz-Romero C.; +6 Authors
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    Authors: Palagano R.; Valli E.; Tura M.; Cevoli C.; +4 Authors

    INTRODUZIONE Come ben noto, il contenuto in etil esteri degli acidi grassi (EEAGs) è considerato un parametro diretto di qualità da applicarsi per definire l’appartenenza di oli vergini di oliva (VOOs) ad una specifica categoria (limite fissato a ≤35 mg/kg per la categoria extra vergine di oliva per la legislazione UE) ed è anche ritenuto un parametro indiretto utile per mettere in luce possibili miscele fraudolente tra un olio extra vergine di oliva ed un olio soft deodorato [1]. In questo lavoro è stato proposto un approccio analitico alternativo al metodo ufficiale con lo scopo di offrire una procedura non in linea HPLC-GC-FID migliora tiva in termini di tempo di analisi, volume di solventi e livello di complessità. Più nello specifico, è stato impiegato l’HPLC per collezionare i EEAGs dagli oli vergini di oliva (VOOs) al posto della tradizionale cromatografia liquida su colonna. Inoltre, è stato testato anche un iniettore di vaporizzazione a temperatura programmata (PTV) come possibile alternativa a quello on-column poichè il PTV è considerato più versatile consentendo il controllo programmato e l’ottimizzazione della modalità di iniezione (split/splitless). Le prestazioni del metodo alternativo sono state valutate controllando i risultati ottenuti per differenti parametri che caratterizzano il protocollo di validazione interna [2]. A tale scopo, sono state analizzate tipologie specifiche di campioni quali olio di oliva raffinato aggiunto di cinque concentrazioni diverse di standard puri degli analiti di interesse e campioni reali VOOs caratterizzati da concentrazioni diverse di EEAGs (basso, medio ed alto contenuto di EEAGs) ed applicando in parallelo i due metodi (alternativo vs ufficiale). INTRODUCTION As well known, the content in fatty acid ethyl esters (FAEEs) represents a direct quality parameter to define the quality grade of virgin olive oil (VOOs) (limit set at ≤35 mg/kg oil for extra virgin olive oil category for EU regulation), and it is also considered an indirect parameter to detect fraudulent mixtures of EVOO with lower quality oils such as soft deodorized olive oils [1]. In this work, the official method has been revised to propose an alternative off-line procedure based on HPLC-GC-FID, more suitable in terms of time of analysis, volume of solvents and level of complexity. Specifically, the analytical protocol proposed HPLC for collecting FAEEs from VOOs instead of the traditional liquid chromatography of the official method. Moreover, a programmed temperature vaporizer (PTV) injector was tested as an alternative to the on-column one because PTV is considered a more versatile option as the temperature control is time-programmed and the injection mode (split/splitless) can be optimized. The performance of the alternative method was evaluated, checking the results in terms of several parameters regarding in-house validation protocol [2]. For this control, specific kinds of samples as refined olive oil spiked with five concentrations of a pure standard of analytes of interest and real VOOs characterized by different contents of FAEEs (low, medium, high) were analyzed applying in parallel the two methods (alternative vs official) (see the Figure). RESULTS The main advantages of this revised protocol may be summarized as: i) significant reduction in time and solvents needed (reduction of more than 50% and 80% for time and solvents, respectively compared to the official procedure); ii) simplification of the separation step of FAEEs fraction avoiding the manual packing of the glass column for the liquid chromatography; iii) satisfactory performance in terms of in-house validation results: linearity showed linear response between 2.5 and 50 mg/L; percentages of standard deviation related to intra-day and inter-day precision were lower than 15%; LOD and LOQ were lower than 1 and 1.5 mg/kg, respectively; in the case of the concentration of FAEEs closer to the legal limit, the recoveries of each analyte were higher than 94%; iv) no significant differences were evidenced for analytes of interest when the alternative procedure offline HPLC-GC-FID with PTV injector was applied to actual samples with low, medium and high content of FAEEs with respect to the official method.

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